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細胞培養(yǎng)中,需要警惕的關(guān)鍵點

更新時間:2023-03-12  |  點擊率:552

許多解決重大疾病的研究,都是以細胞生物學(xué)為基礎(chǔ)的。而細胞生物學(xué)研究的重要手段之一,就是細胞體外培養(yǎng)技術(shù)??梢赃@樣說,沒有細胞培養(yǎng)技術(shù),就沒有如今的細胞生物學(xué)。

細胞培養(yǎng)指在人工創(chuàng)造的與體內(nèi)環(huán)境相似的體外條件下,比如適宜的溫度、pH,以及一定的營養(yǎng)成分,使細胞生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種技術(shù)。不同細胞在進行體外培養(yǎng)時,在操作上會有些許不同,需要根據(jù)細胞類型與實驗?zāi)康?,摸索合適的培養(yǎng)條件。

但原則上講,需要注意以下幾個關(guān)鍵點:

一、嚴(yán)格的無菌環(huán)境

實驗環(huán)境的污染是細胞培養(yǎng)的大忌。細菌、真菌、支原體等微生物的污染,都會造成細胞出現(xiàn)凋亡、裂解等狀況,進而影響實驗結(jié)果。因此,要定期對實驗環(huán)境進行清潔消毒??梢杂孟疽后w對實驗室的墻壁、地面以及桌椅板凳進行噴灑和擦拭,一定時長的紫外線照射,都有不錯的效果。

選擇污染清除試劑,如德國MB公司的Mycoplasma-off,對實驗臺面實驗儀器等進行噴灑和擦拭,有效預(yù)防各類污染。


對于培養(yǎng)箱水槽、恒溫水浴鍋,這類衛(wèi)生死角,可定期更換無菌水,并在水中添加德國MB公司的Water Shield,也能起到預(yù)防作用。



二、選擇優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)試劑

細胞用的培養(yǎng)試劑多選用分析級別的試劑。其中,胎牛血清的選擇很重要。劣質(zhì)的胎牛血清不但有污染細胞的風(fēng)險,而且還會因為營養(yǎng)成分的缺乏,改變細胞狀態(tài),影響實驗結(jié)果。

優(yōu)質(zhì)的胎牛血清,采自5-8月齡牛胚胎,富含各類細胞生長繁殖所需的營養(yǎng)成分,在出廠前均應(yīng)通過質(zhì)量檢測,出具《檢測報告》。

締一生物的Ausbian進口胎牛血清,選擇內(nèi)毒素更低的批次,內(nèi)毒素≤3EU/ml,降低內(nèi)毒素對細胞的影響,運輸全程冷鏈,避免反復(fù)凍融,每批次附有檢測報告。



三、正確的實驗操作

在進行細胞實驗時,要嚴(yán)格按照操作流程進行實驗。注意實驗儀器的規(guī)范用法與無菌操作,避免因?qū)嶒灢僮鞫鴰淼念~外污染。

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